慢病毒(Lentivirus)是一類改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒載體,基因組為RNA,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。 慢病毒基因組進入細胞后,DNA整合到細胞基因組中。慢病毒介導的基因表達或小RNA干擾作用持續且穩定,隨細胞基因組的分裂而分裂。
紐赫生物慢病毒的生產和指控采取了國際學術界公認的標準流程,采用三質粒系統在293FT細胞中進行包裝。所獲得的病毒顆粒經過超速離心純化,并通過熒光發對病毒基因拷貝進行滴定。一般情況下我們的慢病毒的滴度在108~109TU/ml,完全可以滿足各類實驗的使用要求。
慢病毒生產流程
step 1 慢病毒質粒構建及大量抽提
step 2 慢病毒骨架質粒與包裝質粒共轉染293T細胞
step 3 病毒收集與濃縮
step 4 滴度測定
慢病毒感染細胞時,由于細胞的來源、代數和細胞狀態等因素的影響,MOI值在不同實驗室也略有差異,下面我們提供公司部分細胞的慢病毒MOI感染參數,供實驗參考(以下數據是細胞感染效率在80%細胞狀態良好的情況下獲得的):
<RNAi干擾(基因沉默)
<質粒構建
<穩定細胞株篩選
<非編碼RNA研究
<一站式課題服務
<microRNA靶基因驗證
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